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生物化学与生物物理进展 2010
促红细胞生成素基因修饰的胎肝基质细胞促进脐血cd34+细胞向红系分化Keywords: 胎儿肝脏,基质细胞,慢病毒,促红细胞生成素,转基因 Abstract: 通过重组慢病毒系统感染人胎肝基质细胞(fetalliverstromalcells,flscs),建立了能够稳定高效表达促红细胞生成素(erythropoietin,epo)的细胞株epo/flscs.从胎儿肝脏克隆epo基因,构建重组慢病毒epo的表达载体,感染flscs,根据荧光表达强弱进行流式分选,获得能够继续稳定传代的高表达epo基因的flscs,rt-pcr和elisa结果证实,细胞株中的epo基因稳定表达.rt-pcr结果显示,flscs的epo在mrna水平的表达分别是未转染flscs和转染空载体flscs的5.63倍和5.71倍.elisa法检测了转染重组慢病毒epo表达载体的flscsepo蛋白表达水平,结果显示epo蛋白的表达水平也明显升高.收集epo/flscs的条件培养基,体外诱导脐血cd34+细胞向造血细胞分化,结果显示向红系定向分化的细胞比例明显居多,有可能为临床细胞治疗提供稳定、高质量的细胞来源.
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