基因谱系示踪技术揭示小鼠tbx18+心脏祖细胞向心系细胞分化的潜能

心脏祖细胞(cardiacprogenitorcells，cpcs)的研究对阐明先天性心脏病的机制及治疗心血管疾病具有重要意义．哺乳动物的心脏组织由多种不同cpcs分化形成．转录因子tbx18在发育中的心外膜中表达，对心脏的发育形成起重要的调节作用．为了在组织及活体细胞水平检测和阐明tbx18+cpc的分化潜能，应用cre-loxp系统建立tbx18+cpcs基因命运谱系示踪模型：tbx18-cre/rosa26r-eyfp和tbx18-cre/rosa26r-lacz双杂合基因敲入小鼠．该双杂合基因敲入小鼠通过cre的表达能有效地示踪tbx18+细胞在胚胎和成年小鼠中的分化命运．tbx18-cre/rosa26r-eyfp双杂合小鼠心脏能非常容易地利用流式细胞分选系统(facs)分离出yfp+细胞，也可在倒置共聚焦显微镜下观察．应用x-gal染色分析其表达模式，揭示tbx18命运谱系参与心房肌、室间隔、心室肌、冠状动脉、瓣膜等的形成．应用免疫荧光技术初步揭示tbx18+cpcs向心脏肌钙蛋白t(ctnt)阳性心肌细胞和平滑肌肌球蛋白重链11(myh11)阳性血管平滑肌细胞分化的潜能．心脏是一个由多种肌肉和非肌肉组织细胞构成的复杂器官．推测tbx18可能在心脏祖细胞向肌源性细胞分化的信号通路中起重要调节作用．在上述研究中应用基因谱系示踪技术，验证tbx18可作为一类cpcs的标志，为更深入揭示心脏祖细胞向心系细胞的分化潜能打下基础．