高内涵法探讨土槿皮乙酸对mcf-7细胞抑制作用的机制

土槿皮乙酸(pseudolaricacidb，pab)是土槿皮(金钱松根皮)的主要生物活性成分，对多种人肿瘤细胞有细胞毒性作用．高内涵分析(highcontentanalysis，hca)是一种基于荧光显微技术的新技术，它以细胞为研究对象，可以同时对多个荧光靶点的荧光强度、分布，以及细胞形态进行自动化定量分析．利用高内涵分析、流式细胞术研究pab对人乳腺癌mcf-7细胞抑制作用的机制．磺酰罗丹明实验显示，pab抑制mcf-7细胞增殖，且呈现出剂量和时间依赖性，72hic50为(1.80±0.33)μmol/l．流式细胞术碘化丙锭(pi)单染显示pab作用24h，可致mcf-7细胞g2/m期比例增至93%以上，annexinv-fitc和pi双染显示pab促进mcf-7细胞凋亡．高内涵分析显示：pab作用16h，mcf-7细胞有丝分裂指数可达40%左右，伴有cyclinb1含量增加；pab促进微管解聚，干扰有丝分裂二极纺锤体形成；pab引起线粒体增生；pab导致“葡萄串样”细胞核形成，提示有丝分裂滑脱．结果表明，pab抑制mcf-7细胞增殖、促进mcf-7细胞凋亡，这些作用可能与其促进微管蛋白解聚、干扰二极纺锤体形成、阻滞有丝分裂、促进线粒体增生有关．