cd自杀基因系统对t淋巴细胞作用的实验研究

去除供者骨髓中的t淋巴细胞可有效防止移植物抗宿主病(gvhd)的发生.用含大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（ec-cd）基因的高滴度逆转录病毒(1.5×105cfu/ml)感染小鼠t淋巴细胞，g418筛选，获得稳定表达cd基因的t/pcd2细胞.经pcr和rt-pcr方法检测证明cd基因已成功地导入t淋巴细胞中并有效表达.分别用不同浓度的5-fcyt作用于t/pcd2及t淋巴细胞，光镜下观察不同时间细胞数目变化及mtt法检测细胞活性.结果表明，5-fcyt浓度大于1μmol/l时，即对t/pcd2细胞有显著的杀伤作用，而对正常t淋巴细胞基本无毒性，且t/pcd2细胞在加入药物后生存时间（3～5d）明显短于未转染的t淋巴细胞（大于14d）.