jab1与糖皮质激素受体的相互作用及对其转录活性的影响

应用酵母双杂交方法筛选到与糖皮质激素受体(gr)结合的蛋白jab1，进一步验证jab1与gr的结合作用并证明其对gr的影响.构建与gal4-bd融合表达的载体pgbkt7-grlbd，与构建于pact2载体上的人骨髓cdna文库杂交，在sd/-ade/-his/-leu/-trp选择培养板上培养，经x-α-gal检测，阳性克隆片段插入pgem？-tvector载体，测序，再经酵母双杂交和gstpulldown蛋白质结合实验验证其结合作用，应用反映gr转录活性的cat报告基因检测jab1对gr的调节活性.结果在人骨髓cdna文库中,筛选到42个x-α-gal检测变蓝且含有pact2质粒序列的克隆，其中有5个克隆的序列皆为jun活性区结合蛋白jab1的一部分.酵母双杂交和蛋白质结合实验表明，jab1与cos7真核表达的gr-lbd在体外有结合作用.jab1加强gr转录激活的能力.