蛋白质酪氨酸磷酸化在抗失巢凋亡的癌细胞中的失调变化

失巢凋亡是细胞与细胞外基质脱离发生的一种特定的凋亡方式.癌细胞抗失巢凋亡或失巢生存能力可以使之在转移过程中生存.业已发现癌细胞失巢生存与pi3k-pkb/akt、mapk这两条重要信号途径有关，但是pi3k-pkb/akt、mapk通路的上游酪氨酸激酶途径还不甚清楚.为此设计了一种基于sh2-ptyr特异性结合特性的功能性筛选方法，以期发现癌细胞失巢生存相关的酪氨酸磷酸化蛋白质，为最终明确酪氨酸激酶途径提供有力的实验依据.实验发现，mdck细胞悬浮培养后失巢凋亡，但癌细胞可以失巢生存.与这一现象相一致的是，悬浮培养后，mdck细胞中一系列sh2结合的酪氨酸磷酸化蛋白质水平急剧下降，而癌细胞中蛋白质酪氨酸磷酸化水平并不呈锚着依赖性.细胞悬浮培养后，随着培养时间的延长，mdck细胞中ablssh2结合的靶蛋白酪氨酸磷酸化水平逐渐降低，在h460肺癌细胞中经过短暂下降后升高，h1792肺癌细胞随着培养时间的延长，ablsh2结合的靶蛋白酪氨酸磷酸化水平逐渐增加.fynsh2和crksh2结合的蛋白质分别为fak和p130cas，后者是重要的失巢生存信号.这些结果提示，酪氨酸磷酸化蛋白质可能赋予肺癌细胞失巢生存能力.结果也表明，功能性sh2筛查方法可以有效地发现肿瘤细胞中失巢生存相关的酪氨酸磷酸化蛋白质.