日本血吸虫期别差异表达基因文库的构建及分析

为从期别差异表达基因分析入手研究血吸虫的生长发育机制，应用抑制性消减杂交(suppressedsubtractivehybridization，ssh)技术首次构建了日本血吸虫尾蚴、虫卵和成虫的期别差异表达基因文库.经消减效率分析和三种文库克隆的est的期别差异性鉴定，表明所建文库质量较高，为在整个基因组水平分离血吸虫的差异表达基因提供了重要材料.由三个文库选择257个插入片段大于500bp的克隆测定了est序列.同源性分析结果表明257个est代表182种血吸虫基因，其中有22种为血吸虫已知基因，有128种为血吸虫已知est，有32种为新发现的血吸虫基因.对est编码蛋白的功能预测结果显示：尾蚴消减文库的基因多与运动、能量代谢、转录调节及致病性相关；虫卵消减文库的基因可能参与信号转导、细胞粘附、蛋白质和碳水化合物的代谢以及抗氧化反应；成虫消减文库的基因多参与蛋白质的合成、转运及分解代谢，参与虫体的运动等.大规模分离、分析血吸虫期别差异表达基因将对从分子水平去解读血吸虫的生长发育机制，筛选高效疫苗候选抗原、药物靶标及诊断制剂有重要意义.