rnf149通过泛素化介导的cd9降解调控细胞增殖

选取功能未知的泛素连接酶rnf149作为研究对象．该分子同grail(generelatedtoanergyinlymphocytes)具有较高的同源性，属于ⅰ型跨膜蛋白．激光共聚焦显微镜的观察结果显示，rnf149是一个定位在溶酶体上的蛋白质，它与cd9在细胞内有共定位．免疫共沉淀实验证明rnf149与cd9有相互作用．rnf149通过泛素分子的第48位赖氨酸多泛素化cd9．在hela细胞中转染数量一定的cd9质粒和数量梯度增加的rnf149质粒24h后，蛋白质印迹检测外源rnf149和cd9的表达，结果表明，随外源rnf149表达量梯度增高，外源cd9的表达量梯度降低．在hek293t细胞内以shrna敲低内源的rnf149，并检测内源cd9的变化，发现rnf149被敲低后内源cd9的量增多．上述结果提示，cd9很有可能是rnf149的底物，被rnf149通过泛素化降解．此外，rnf149被敲低的hek293t细胞增殖受到抑制，这可能与其内源cd9的量增多有关，提示rnf149可能是一种细胞增殖的调控因子．