铜绿假单胞菌las系统信号分子对小鼠巨噬细胞影响的体外研究

对于包括铜绿假单胞菌在内的众多微生物而言，群体感应系统是细菌表达毒力因子的重要调节子．las和rhl是群体感应两个主要组成部分．las和rhl分别受自诱导剂n-3-氧化十二烷酰基-l-高丝氨酸内酯(3-oxo-c12-hsl)和n-丁酰-l-高丝氨酸内酯(c4-hsl)的影响．最近的研究进展显示群体感应分子尤其是3-oxo-c12-hsl具有调节宿主免疫系统的能力．本实验展示了3-oxo-c12-hsl可以诱导鼠源巨噬细胞(raw264.7)的凋亡和吞噬作用．把合成的3-oxo-c12-hsl加入raw264.7细胞培养基中，发现细胞生活力以一种依赖于3-oxo-c12-hsl的浓度(6.25to100μmol/l)和培养时间(2to24h)的方式逐渐丢失．同样，我们观察到3-oxo-c12-hsl的细胞毒活性，用3-oxo-c12-hsl处理的细胞出现细胞形态上的改变，这一改变表明3-oxo-c12-hsl处理的细胞加速凋亡，这一点同时也被其他多个标准(caspases3、8和9，线粒体膜电位，磷脂酰丝氨酸的表达)所证实．中性红吞饮实验证明，3-oxo-c12-hsl会显著地减小raw264.7细胞的吞噬能力(p<0.05)．同时，高浓度的3-oxo-c12-hsl会降低raw264.7细胞对铜绿假单胞菌的吞噬作用(p<0.001)．这些数据表明3-oxo-c12-hsl能特异性地促进细胞凋亡的诱导和raw264.7细胞吞噬能力的减小．这可能和3-oxo-c12-hsl诱导的细胞毒性有关．最终我们的实验数据证明，群体感应信号分子3-oxo-c12-hsl在铜绿假单胞菌感染的致病机理中扮演着重要的角色．