油菜黄化突变体蛋白质组分析：两种蛋白质提取方法比较

以芥菜型油菜黄化突变体l638-y及其野生型l638-g五叶期叶片为材料，用ief/sds-page双向凝胶电泳技术对两种不同蛋白质提取方法(tca/丙酮沉淀法和改进的peg分级沉淀法)进行了比较，同时在ipg胶条ph范围及sds-page胶浓度选择上进行了探索与优化．结果表明，以ph4～717cm的线性ipg胶条进行ief，11%sds-page进行第二向电泳，每350μl体系上样量为180μg，蛋白质可以得到较好的分离，2-de图谱质量最佳．用改进的peg分级沉淀法提取的突变体l638-y叶片总蛋白的2-de图谱可清晰识别的蛋白质点数目为(1235±6)个，比tca/丙酮沉淀法多识别出330个蛋白质点；用该方法提取蛋白质时，在突变体l638-y与其野生型l638-g叶片总蛋白2-de图谱上可识别出差异蛋白质点数目为190个，比用tca/丙酮沉淀法提取蛋白质时多鉴别出100个差异蛋白质点．由此表明，研究芥菜型油菜黄化突变体l638-y叶片蛋白质组变化，采用改进的peg分级沉淀法提取蛋白质更为简单有效．