人巨细胞病毒糖蛋白52kd抗原编码区段在大肠杆菌中高效表达

采用聚合酶链反应,从人巨细胞病毒重组质粒克隆pbh中扩增并分离了含糖蛋白52kd抗原编码区段;扩增产物经纯化和ecorⅰ酶切后,与相同酶切的高效表达质粒pbv-220重组,构成含人巨细胞病毒糖蛋白52kd抗原编码区段的高效表达质粒phcmv52;用此重组表达质粒转化大肠杆菌jm101,经增殖和42℃温度诱导以及筛选。阳性克隆经12.5％sds-page表明,外源基因表达蛋白质量占菌体溶解液中蛋白质总量20％。蛋白质印迹(westernblot)杂交证实该表达产物具有免疫原性。