幽门螺杆菌alpa基因中四种黏附素基因保守区的克隆、表达、纯化及鉴定

幽门螺杆菌（helicobacterpylori，hp）感染是慢性活动性胃炎和消化性溃疡的主要病因，与胃腺癌、胃黏膜相关淋巴样组织（malt）淋巴瘤的发生亦密切相关.鉴于hp已证实的四种粘附素保守区（ab）是外膜蛋白（omp）和膜孔素(porin)样成分，而外膜蛋白和膜孔素样成分是优秀的疫苗候选抗原.用pcr技术扩增ab基因，将其定向插入pet-22b（+）载体，在bl21（de3）大肠杆菌中表达.测序显示ab基因长588bp,编码195个氨基酸.sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶扫描分析，ab基因表达的蛋白质分子质量约为22.5ku，其重组蛋白质表达量占菌体总蛋白质的29%，表达产物经亲和层析纯化后蛋白质纯度达96%.经免疫印迹证实该重组蛋白可以被alpa免疫兔血清所识别.ab蛋白的获得为进一步研究hp黏附素保守区的分子黏附机制和免疫防治作用提供了基础.