重组人凋亡诱导因子基因的构建、表达及其对hela细胞的促凋亡作用

凋亡诱导因子（apoptosis-inducingfactor,aif）定位于细胞的线粒体膜间隙.当凋亡信号刺激时，aif分子从线粒体释放到胞浆，然后转位到细胞核内，引起染色体核周边凝集和dna呈大片段断裂（～50kb）.用rt-pcr法分段克隆得到人全长aif基因，经改造截去其n端线粒体定位信号编码序列，代之以不同长度的绿脓杆菌外毒素(pe)转膜结构域序列.把这些重组基因克隆入pires2-egfp真核表达载体，脂质体法转染hela细胞，通过荧光显微镜观察、共聚焦显微镜观察、电镜观察等方法检测了多种重组人aif基因的表达及其对细胞生长的影响.证明了重组人aif基因的表达可引起hela细胞死亡，为肿瘤的杀伤提供了新的策略.