无血清培养基生产重组人红细胞生成素的纯化

用无血清培养基在生物反应器中培养cho-epoc2细胞株，培养上清中重组人红细胞生成素表达水平达10～21mg/l.培养上清经过三步纯化后纯度可达到98%以上，比活性约为1.5×105u/mg.纯化第一步使用反相柱层析，可将样品体积浓缩约30倍.取其收集液进行deae-离子交换柱层析，最后进行分子筛层析，全过程回收率为40%左右.sds-page表明，所制备终产品分子质量为35～40ku，等电聚焦方法测其等电点在3.75～4.15之间，均属文献报道范围；elisa和蛋白质印迹实验结果证明其具有天然红细胞生成素抗原性；采用溴化氰裂解方法做肽谱电泳，结果与理论推测相符.该纯化路线简单、迅速、高效,重复性好，可用于规模化生产临床使用重组人红细胞生成素.