三种丙型肝炎病毒转基因小鼠系的同时制备

为研究丙型肝炎病毒的致病致瘤机理及结构基因与非结构基因3区(ns3)的功能及其在hcv感染致病中的作用,建立一个hcv分子治疗的动物模型,构建了含金属硫蛋白启动子和hcv结构基因或ns3基因的质粒,将两者等量混合后用显微注射法接种于昆明白小鼠受精卵内制备转基因小鼠.通过pcr筛选获得三种整合hcv结构基因或/和ns3基因的首建鼠.结果表明:a.注射后卵存活率与仔鼠出生率分别为81%、30%;b.检测60只g0代小鼠,结构基因整合鼠6只(10%),ns3基因整合鼠4只(6.7%),双基因整合鼠9只(15%),总整合率为31.7%;c.rt-pcr法检测阳性鼠肝中有靶基因mrna的转录;d.4只首建鼠与正常鼠回交获得38只g1小鼠,其中20只为整合鼠,整合率为52.6%;e.转基因鼠表型迄今无明显异常.表明一次显微注射同时获得了三种整合hcv结构基因或/和ns3基因的转基因小鼠.