rna干扰技术对肝癌细胞内源survivin基因表达的影响

应用rna干扰技术（rnai）研究针对凋亡抑制因子survivin的sirna抑制肝癌细胞株内源survivin基因的表达.转染重组质粒pshrna-survivin至肝癌细胞株smmc-7721，通过免疫荧光、蛋白质印迹和半定量rt-pcr检测survivin蛋白表达及mrna转录水平的变化.结果表明：构建的三种重组质粒pshrna-survivin1/2/3均能明显抑制survivin基因的表达；应用免疫荧光检测survivin基因的表达，转染重组质粒pshrna-survivin的实验组survivin荧光强度明显低于转染载体ptzu6＋1和pshrna-gfp对照组；蛋白质印迹结果表明，重组质粒pshrna-survivin明显抑制survivin蛋白的表达，抑制率为62%～78％，通过半定量rt-pcr检测到survivin基因mrna转录明显减少，抑制率为57%～64％.由上述结果可以得出结论：重组质粒pshrna-survivin可明显抑制smmc-7721细胞内源survivin的表达和mrna的转录，为survivin介导的肿瘤基因沉寂疗法提供实验基础.