东方鲎factorc中的结构域在结合脂多糖中的作用

factorc是鲎血细胞中的一种丝氨酸蛋白酶原，因其能以高亲和力结合脂多糖(lps)，在医药产品的内毒素检测中起着重要的作用.以往研究表明处于n端的3个sushi结构域对factorc的lps结合活性起着关键作用,而factorcn端的其他3个结构域，包括cys-rich结构域、egf-like结构域和lectin-like结构域对lps结合活性的影响尚不清楚.利用bac-to-bac昆虫细胞表达系统可使rfactorc及其4个截短的片段rces123l，rces123，rs123l和rs123获得表达，并且可采用亲和层析柱将这5个重组表达产物纯化.通过测定5个重组表达产物的lps结合活性及抑菌活性，可以确定factorc的lps结合位点位于s123区域.尽管cys-rich结构域、egf-like结构域和lectin-like结构域中不存在lps结合位点，但当这3个结构域同时存在时,可提高factorc或ces123l的lps结合能力，因此rces123l具有与rfactorc非常相近的lps结合能力.实验结果表明,rces123l在昆虫细胞中的表达量比rfactorc高出4倍，预示出rces123l在医药领域的应用前景.