肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白cep65相互作用蛋白的筛选与鉴定

cep65蛋白(cancerandembryoexpressionprotein65)为肿瘤单克隆抗体3h11所识别的抗原分子,rt-pcr及rna印迹检测表明,cep65蛋白表达于肿瘤及胚胎组织.为了研究cep65在肿瘤发生中的作用机制,以cep65为诱饵蛋白,通过酵母双杂交体系筛选人胚胎组织cdna表达文库.从5.2×106个克隆中筛选得到14个阳性克隆，并在酵母体系中通过不同方法得到验证.在此基础上，选取在双杂交中作用明显的51号克隆,与cep65作gstpull-down实验,结果证明,cep65与51号阳性克隆蛋白确能相互作用.生物信息学分析发现,cep65与51号阳性克隆蛋白相互作用,可能通过ww结构域或者蛋白激酶c对细胞的增殖与分化起到调节作用.