端粒酶催化亚基基因在小鼠胚胎发育早期的转录活性

用rt-pcr引物分别扩增成年昆明(km)小鼠睾丸、脾脏、肾脏、肝脏和胸腺组织的总rna发现，端粒酶催化亚基基因tert在这些组织中都有转录，目标产物正确组装到pmd18-t载体后测序，结果与已知cdna序列一致.pmsg/hcg超数排卵方法获得km小鼠成熟卵母细胞和czb溶液体外培养的胚胎(km♀×km♂)，用酸性tyrode's溶液消化透明带后，采用巢式rt-pcr，同时分析tert基因和持家基因hprt的转录发现，对于单个样品来说,全部卵母细胞(15h-posthcg，10/10)都存在hprt转录本，其中，只有40%(4/10)还同时存在tert转录本.原核形成初期(20h-posthcg，6/6)和原核晚期(30hpost-hcg，8/8)的受精卵，以及发育至2-c早期的胚胎(35h-posthcg，7/7)都不转录tert基因，只有hprtmrna存在；2-c晚期(50h-posthcg)时，两个基因同时转录(4/8)和一个基因单独转录(4/8)的胚胎各占50%；从4-c阶段(65h-posthcg，4/4)开始，包括8-c阶段(75h-posthcg，4/4)，桑椹胚阶段(93h-posthcg，4/4)，直至囊胚阶段(118h-posthcg，4/4)，所有的胚胎都同时转录tert和hprt基因，而且转录水平明显升高.以20枚胚胎量为模板进行rt-pcr发现，原核早期，原核晚期的胚胎中仍然没有tert基因转录，只有hprtmrna，但是，在2-c早期胚胎中同时检测到了hprt和tert两种mrna.结果表明，持家基因hprt在成熟卵母细胞受精前后，以及胚胎早期发育过程中均存在转录本.40%卵母细胞中存在的tertmrna在受精后很快降解，检测不到；胚胎基因组在2-c早期开始转录tertmrna，转录水平逐渐上升.结果暗示，小鼠胚胎的基因组dna在2-c早期开始启动，功能基因tert也在此时开始转录，可能与胚胎发育初期的染色体保护有关.