connexin31相互作用蛋白筛选、证实与功能研究

筛选间隙连接蛋白31(connexin31，cx31)相互作用蛋白并研究其在cx31运输中的功能.运用制备的抗cx31多克隆抗体免疫沉淀，sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，蛋白质条带回收，蛋白质胶块酶解，电喷雾-四极杆-飞行时间质谱分析，数据库扫描筛选可能相互作用蛋白，可能互作蛋白经免疫共沉淀、细胞免疫共定位等证实，确定actin为cx31相互作用蛋白.用药物处理细胞，抑制actin的功能，观察cx31定位与间隙连接通道的通透性，确定actin在cx31运输中的功能.当药物抑制actin的功能时，cx31很少能到达细胞膜上形成间隙连接通道，cx31主要分布在胞质中；当药物抑制tublin的功能时，cx31能到达细胞膜上形成间隙连接通道，细胞免疫荧光实验显示间隙连接斑有增多的现象，但染料转移实验表明细胞膜上间隙连接通道并没有增加.actin在cx31运输至细胞膜上形成间隙连接通道的过程中具有重要作用.