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生物化学与生物物理进展 2004
snf2家族新成员ercc6l的cdna克隆与表达分析(英)Keywords: ercc6l,基因克隆,snf2蛋白,表达谱,亚细胞定位 Abstract: snf2家族蛋白在基因组复制、修复与表达中具有重要作用.报道了snf2家族新成员ercc6l(excisionrepaircross-complementingrodentrepairdeficiency,complementationgroup6-like)的cdna克隆、特性与表达分析.通过表达序列标签(est)搜索和组装,获得了cdna全长4002bp的新基因ercc6l(genbankacc.noay172688),然后通过rt-pcr在小鼠胚胎心脏成功克隆了该基因.ercc6l在小鼠基因组中由两个外显子和一个内含子组成,定位于x染色体,最大开放阅读框(orf)编码一个含1240个氨基酸的假定蛋白质.该假定蛋白质含有snf2蛋白的8个保守基序(snf2结构域).通过与snf2家族各亚家族的成员进行多重比对,初步确认ercc6l属于ercc6亚家族成员.将ercc6l编码区克隆到pegfp-c3然后转染hela,3t3和b16细胞,融合蛋白主要定位于胞浆.blast搜索检索出69条小鼠est与ercc6l同源,这些est主要来自胚胎和肿瘤组织.对小鼠不同发育时期的多种组织进行rt-pcr,发现ercc6l在胚胎期强表达,出生产后表达显著下调.这些结果提示ercc6l在胚胎发育和肿瘤发生中可能具有重要作用.
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