人α-乳清蛋白基因的克隆及其在转基因小鼠中高效表达

从粘粒文库中筛选出人α-乳清蛋白基因，构建9.5kb的转基因表达载体.利用显微注射的方法获得68只f0代小鼠，经pcr检测和dna印迹分析证实有8只小鼠（4♂，4♀）为整合人α-乳清蛋白基因的转基因阳性小鼠，整合率为11.7%，整合拷贝数在1至8之间.利用sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测和蛋白质印迹分析,4只雌性f0代转基因阳性小鼠全部表达了人α-乳清蛋白.放射免疫测定法测定,含量分别为0.62g/l、0.48g/l、0.56g/l、3.21g/l；同时测定f0代50号转基因公鼠的后代阳性母鼠（50-2号）乳样中人α-乳清蛋白含量也达到1.03g/l，证明由原代转基因公鼠遗传给后代的人α-乳清蛋白基因亦获得了稳定的表达.所构建的人α-乳清蛋白转基因载体具有结构较小，表达量高，可以稳定遗传等优点.为利用人α-乳清蛋白基因改善牛乳成分和品质奠定了基础.