破色期番茄果实均一化cdna沉默文库的构建和功能基因筛选模型的初步建立

番茄果实的成熟是由多基因精细调控的一个过程．利用破色期番茄果实，根据复性动力学原理在mrna水平进行均一化操作使高丰度和低丰度的mrna丰度接近．然后把均一化之后mrna反转录得到cdna，再与基因沉默载体ptrv重组，最后把构建好的载体通过电转化的方法转入到gv3101农杆菌中，从而建立起破色期番茄果实均一化cdna沉默文库．通过番茄果实中病毒诱导基因沉默技术，对cdna沉默文库进行初步筛选，从而确定功能基因筛选模型．在模型建立阶段，以番茄红素合成途径相关的pds基因作为内标基因，在100个混合农杆菌样中，成功筛选到了pds基因．