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ISSN: 2333-9721
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牛小脑肌醇磷脂激酶pi(4)k高产率纯化与特征

Keywords: 信号传导,牛小脑,肌醇磷脂激酶,纯化方法

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Abstract:

对牛小脑膜区肌醇磷脂激酶进行了11500倍纯化,过程包括:tritonx-100抽提,硫酸铵沉淀,阳离子交换层析(phosphocellulose),亲和层析(heparinsepharosecl-6b)和阴离子交换层析(deae10,fplc)等.纯化程度可达95%以上,对sds-page电泳结果进行扫描分析测其分子质量为56ku.纯化的肌醇磷脂激酶的特异活性为450nmol/mg·min,动力学性质表现为atp的表观km值为7.9×10-7mol/l,pi的表观km值为6.6×10-7mol/l.腺嘌呤核苷是该酶的有效抑制剂,3.5×10-7mol/l腺嘌呤核苷可使该酶活力降低约50%,而tritonx-100对该酶活力具有刺激作用,0.5%tritonx-100可使该酶表现为最高活力.

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