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ISSN: 2333-9721
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大肠杆菌topa-菌株中质粒pbr322的超凝集结构

Keywords: 超凝集dna,大肠杆菌dm800,原子力显微镜,拓扑异构酶ⅳ

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超凝集dna是质粒dna的一种特殊拓扑结构形式,最初在大肠杆菌sd108(topa+gyrb225)细胞中被发现.现在大肠杆菌dm800(topa-gyrb225)细胞中也发现了这种结构,这说明超凝集dna的形成与细胞内旋转酶活性降低有直接关系,而与拓扑异构酶ⅰ的存在与否无关.体外实验的结果显示,具有很强的正超螺旋松弛活性的拓扑异构酶ⅳ可以将超凝集dna完全松弛,这也证明质粒dna的超凝集结构与超螺旋结构在细胞内是可以互变的.使用原子力显微镜对分离到的pbr322dna超凝集结构进行分析,并与普通超螺旋进行比较,结果表明,超凝集dna分子的结构发生了巨大的变化,其分子长度比正常超螺旋分子缩短了约30%,宽度和高度则增加了60%,结构更接近于a型dna.另外,原子力显微镜研究结果表明,氯喹的嵌入并非改变了超凝集dna的超螺旋状态,而是使其打结并最终压缩成一团.

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