大肠杆菌(escherichiacoli)体外脂肪酸合成反应的重建

pcr扩增大肠杆菌参与脂肪酸合成的7个主要酶基因：fabd、fabg、fabh、faba、fabz、fabb和fabi，并构建相应的表达载体，在大肠杆菌bl21(de3)中分别诱导表达酶蛋白，并使用ni-nta琼脂糖纯化到7种酶蛋白．体外添加所需酶蛋白和辅因子，在不使用[2-14c]丙二酸单酰coa的条件下，成功地实现了脂肪酸合成反应的重建，另外还建立了数个鉴定有关酶蛋白功能的标准反应，并用其鉴定了丙酮丁醇梭菌fabz的功能．