重组尿激酶原的纯化和性质研究

cho工程细胞11g持续表达的pro-uk分泌在细胞培养液的上清中，培养液上清经过微孔玻璃(mpg)吸附色谱，羧甲基阳离子交换色谱，高压液相凝胶色谱三步纯化，纯化倍数可达700倍以上，总回收率为46％．再经过benzamidine-sepharose6b亲和层析去掉少量的双链尿激酶，得到纯化尿激酶原．终产物经sds-page银染分析，纯度达90％以上，分子量为52ku，其比活性为51220u/mg．抗体中和、二异丙基氟磷酸(dfp)抑制等实验证明重组pro-uk的性质和天然pro-uk的性质相一致．