弓形虫新基因wx2表位疫苗免疫小鼠的保护研究

采用生物信息学方法对弓形虫新基因wx2进行表位分析预测，pcr扩增基因中编码2个表位的片段w2b和w2a，成功构建新基因的单表位疫苗质粒pcdna3-w2b、pcdna3-w2a和双表位疫苗pcdna3-w2b2a，接种小鼠，观察表位疫苗的免疫保护作用．将表位疫苗分别通过肌肉注射免疫小鼠，对照组注射pcdna3空质粒．elisa法检测血清igg抗体水平，取脾细胞用流式细胞仪检测t淋巴细胞亚群．各组小鼠末次免疫后第4周每只小鼠经腹腔注射弓形虫速殖子500个，观察小鼠的生存时间．结果显示，pcdna3-w2a2b双表位疫苗组小鼠血清igg抗体水平显著高于对照组(p<0.05)，且pcdna3-w2a2b双表位疫苗组小鼠脾细胞cd4+t与cd8+t淋巴细胞比值明显低于两单表位疫苗组，pcdna3-w2a2b双表位疫苗组小鼠存活时间明显长于两单表位疫苗组(p<0.05)．实验结果表明，弓形虫新基因wx2表位疫苗能够诱导小鼠产生抗弓形虫感染保护性免疫，并且弓形虫pcdna3-w2b2a双表位疫苗的免疫保护性优于pcdna3-w2b、pcdna3-w2a两单表位疫苗．