人npcedrg基因启动子的克隆及ccaat/nfy结合位点初步分析

npcedrg基因是采用基因定位候选克隆策略获得的一个鼻咽癌候选抑瘤基因．npcedrg在鼻咽癌细胞和组织中表达下调，重新恢复npcedrg基因在cne2细胞系的表达，可部分逆转cne2的恶性表型．为揭示npcedrg基因在鼻咽癌细胞和组织中表达下调的分子机制，联合应用生物信息学和报告基因载体系统分析方法对npcedrg基因启动子区进行克隆及功能分析，系统发育进化足迹分析结果表明，npcedrg基因5′端调控区-180～+235bp区间在脊椎动物中高度保守，该保守区域中存在包括ccaat/nfy、stat1和sp1等转录因子结合位点．构建luc和/或egfp报告基因表达载体并检测其启动子活性，-146～-8bp区域有较强的启动子活性，电泳迁移阻滞分析实验(emsa)提示，ccaat/nfy转录因子结合位点是npcedrg基因的转录调控元件．因此，研究确定-146～-8bp区域是npcedrg基因核心启动子区域且启动子核心元件ccaat/nfy可能参与npcedrg基因的转录调控．