三种连接子多肽对抗癌融合蛋白翻译后剪切效果比较研究

il-24和smac为靶向癌症的多基因治疗研究中重要的候选基因．在构建il-24和smac双基因表达载体过程中，选择一个稳定高效的连接子非常关键．利用三个不同的连接子多肽序列ietd、eeed、f2a构建三个真核表达质粒pcdna3.1(+)-il-24-ietd-smac、pcdna3.1()-il-24-eeed-smac、pcdna3.1()-il-24-f2a-smac，并联合5-氟尿嘧啶(5-fu)处理研究各连接子介导的融合蛋白剪切效果．上述实验结果表明，在三种il-24-linker-smac双基因表达载体中，f2a连接子剪切效果最佳且与caspase活性成正相关．ietd、eeed连接子介导的融合蛋白都有一定的剪切，但ietd/eeed多肽影响了上游il-24蛋白的半衰期，加速了剪切后il-24蛋白的泛素化降解．本研究为构建靶向癌症应用的双基因或多基因载体提供了设计参考．