mir-122在aldoa介导的ob/ob小鼠肝脏代谢中的作用研究

本实验室前期研究发现，2型糖尿病动物模型ob/ob小鼠血清中mir-122的含量较正常c57bl/6小鼠显著升高．本文进一步研究肝脏特异性mir-122及其靶蛋白aldoa(果糖1,6-二磷酸醛缩酶a)在ob/ob小鼠肝脏代谢中的作用．首先，经qrt-pcr技术检测发现ob/ob小鼠肝脏mir-122水平较c57bl/6小鼠显著下降，而westernblotting分析发现ob/ob小鼠肝脏其靶蛋白aldoa的表达水平显著上升．进一步以mir-122分子转染293t细胞后收集其分泌的微囊泡(microvesicles，mvs)，经qrt-pcr检测确认后采用特异性荧光染料dii-c18标记mvs，以不同剂量尾静脉注射balb/c小鼠体内，不同时间点取肝组织做冰冻切片．在荧光显微镜下观察证实，包裹有mir-122的mvs通过循环系统进入肝脏，同时qrt-pcr定量分析发现肝组织中mir-122含量显著升高，而蛋白质印迹检测发现其靶蛋白aldoa在肝脏中表达显著下降．aldoa主要催化糖酵解途径中果糖1,6-二磷酸和磷酸二羟丙酮及甘油醛-3-磷酸之间的转变，mir-122靶向作用aldoa可能在2型糖尿病的发生发展中发挥重要作用．