ing1家族各异构体抑制hela细胞增殖的分子机制研究

ing1(inhibitorofgrowth1)是一个候选抑癌基因家族，p47ing1a、p33ing1b和p24ing1c是其三种剪接异构体．通过mtt法和流式细胞术研究ing1a、ing1b和ing1c对hela细胞增殖的影响，结果发现三者均可将hela细胞阻滞于g0/g1期并抑制细胞生长．采用pcr方法构建ing1a和ing1b的phd结构域缺失体1a△c和1b△c，进而使ing1a，ing1b、ing1c、1a△c和1b△c在hela细胞中过表达．采用westernblot检测上述hela细胞中p16ink4a、pten/p27kip1和p53/p21waf1的表达变化，结果发现ing1a、ing1b、ing1c和1a△c均可促进p16ink4a的表达，其中ing1c的促进作用最为显著，1b△c则略微抑制了p16ink4a的蛋白质表达．利用荧光素酶分析初步确定1a△c可增强p16ink4a启动子活性而促进p16ink4a的转录，1b△c则抑制了p16ink4a启动子活性．上述结果阐释了ing1家族各成员对hela细胞增殖的影响及其分子机制，从而确定了各异构体功能的异同及它们所调控的重要基因．首次发现除p53/p21waf1通路外，ing1家族各异构体还可通过上调p16ink4a和pten的表达而抑制肿瘤细胞生长，并且ing1a的phd结构域删除体可以增强p16ink4a的转录，这为研究ing1家族抑制肿瘤细胞生长的分子机制提供了新的线索．