caspase-3参与调控蟾酥诱导人肺腺癌(astc-a-1)细胞的凋亡

采用基因质粒转染技术、荧光发射谱检测分析以及荧光共振能量转移(fret)受体光漂白技术，首次在活细胞中实时检测中药蟾酥(chan-su，cs或bufonisvenenum)诱导人肺腺癌(astc-a-1)细胞凋亡过程中caspase-3的活化特性．采用cck-8(cellcouneingkit-8)技术检测发现，蟾酥对细胞的活性具有显著的抑制作用；蟾酥处理稳定表达fret质粒scat3的人肺腺癌细胞后，在不同的时间检测活细胞中scat3的荧光光谱；利用共聚焦扫描荧光显微成像技术检测蟾酥处理后细胞的形态，从而进一步证实蟾酥诱导细胞凋亡．实验结果表明：a.蟾酥可以有效抑制人肺腺癌(astc-a-1)细胞的增殖活性并诱导细胞的死亡．蟾酥对细胞的抑制作用具有剂量依赖性；b.蟾酥处理细胞6h后能检测到明显的细胞凋亡小体，连续作用24h后细胞全部皱褶，并有部分细胞破碎；c.蟾酥作用细胞2h就能明显切割细胞内的scat3，细胞内scat3的切割程度随着蟾酥作用时间的延长而增加，24h内细胞内的scat3完全被切割．受体光漂白实验也证实了该结论，表明caspase-3参与调控了蟾酥诱导的细胞凋亡过程．