骨形态发生蛋白9定向诱导多潜能干细胞成骨分化

为确认和评价骨形态发生蛋白9(bonemorphogeneticprotein9，bmp9)定向诱导多潜能干细胞成骨分化的能力，以鼠间充质干细胞c3h10、小鼠胚胎成纤维细胞(mouseembryonicfibroblasts，mefs)和骨髓基质细胞(bonemarrowstromalcell,bmsc)三种多潜能干细胞为目标细胞，用重组腺病毒的方法将bmp9导入细胞，通过荧光素酶报告基因实验、碱性磷酸酶(alkalinephosphatase，alp)定量测定、钙盐沉积实验、realtimepcr、动物实验和组织化学染色等方法，观察bmp9对于多潜能干细胞成骨分化的定向诱导作用．结果提示，bmp9能诱导c3h10、mefs和bmsc细胞alp的表达，且具有剂量依赖性．bmp9在体外能够促进c3h10细胞和mefs细胞的钙盐沉积．经bmp9刺激后，c3h10细胞成骨相关基因alp、runx2、骨桥素(osteopontin,opn)和骨钙素(osteocalcin,oc)的mrna水平均增加．荧光素酶报告基因实验证实，bmp9可以活化smad和成骨关键基因runx2．动物实验和组织化学染色检查显示，bmp9可以诱导c3h10细胞在裸鼠皮下异位成骨，因此，bmp9具有定向诱导多潜能干细胞成骨分化的能力．