eb病毒lmp1-ctar3对np69细胞增殖和蛋白质表达的影响

为了探讨eb病毒潜伏性膜蛋白1(lmp1)第三个功能活性区域(ctar3)在鼻咽上皮细胞np69中的转化作用机制，采用逆病毒感染的方法，将浓缩的逆病毒rv-lmp1和rv-lmp1δ232～351分别感染鼻咽上皮细胞np69，建立np69-lmp1与np69-lmp1δ232～351稳定表达细胞系．通过绘制生长曲线、平皿克隆形成试验和软琼脂集落形成试验比较野生型和突变型lmp1对np69细胞增殖的影响，运用蛋白质组学方法鉴定np69-lmp1与np69-lmp1δ232～351细胞间的差异表达蛋白，选用实时荧光定量rt-pcr与westernblot对其中部分蛋白质点差异表达进行验证．结果发现：a．突变型lmp1δ232～351促np69细胞增殖的能力较野生型lmp1明显降低(n=3，p<0.05)；b．鉴定了lmp1-ctar3在np69细胞中参与调节的16个蛋白质(表达上调的蛋白质8个，下调的8个)．c．实时荧光定量rt-pcr和westernblot证实了部分上述蛋白质的差异表达．以上结果说明，lmp1-ctar3是其发挥促细胞增殖的重要活性部位，可能通过参与调节g蛋白和异柠檬酸脱氢酶等蛋白质的表达而起作用．