人尿激肽原酶的纯化与鉴定

采用两性离子胶体沉淀和乙醇沉淀相结合的粗提方法，经离子交换、疏水层析、亲和层析及凝胶过滤4个步骤有效地将人尿激肽原酶（hk-1）粗提物纯化，比活提高了1755倍，总得率为70%.用以慈菇蛋白酶抑制剂为配体的亲和层析纯化hk-1，效果理想，整个工艺路线适合产业化生产.纯化产物在sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳上为单带,高压液相色谱(hplc)上为单峰,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测得分子质量为33450u，等电聚焦测得pi在4.3附近，为含糖蛋白.同时测定了该酶的热稳定性和ph稳定性.纯化过程中同时分离得到另一种药用蛋白——人尿胰蛋白酶抑制剂（huti）.