腺病毒介导的upar反义核酸转移抑制肿瘤细胞的侵袭

为了观察尿激酶受体(upar)反义核酸对肿瘤细胞体外侵袭的抑制作用,用pcr方法扩增uparcdna5′端－46bp～＋454bp一段长500bp的序列,利用dna重组技术将其克隆到病毒载体padeno-x中,构建出重组腺病毒载体padeno-x-upar(－)和padeno-x-upar(+).线性化后的重组腺病毒载体转染hek293细胞7天后，可以获得滴度分别为1.5×108pfu/ml和0.5×108pfu/ml的upar反义和正义核酸表达重组腺病毒，分别命名为ad-upar(－)和ad-upar(+).以不同的病毒感染指数（moi）感染人肺巨细胞癌高转移株95d肿瘤细胞，3天后用rna印迹法可以检测肿瘤细胞upar正义和反义核酸表达水平，随着moi的升高，ad-upar(－)感染的肿瘤细胞upar蛋白水平逐渐下降，肿瘤细胞的体外侵袭能力也明显下降，而感染ad-upar(+)的肿瘤细胞无明显变化.结果表明,重组腺病毒可以表达upar正义和反义核酸，upar反义核酸可以明显抑制人肺巨细胞癌高转移株95d肿瘤细胞在体外的侵袭能力.