人干扰素α2b-胸腺肽α1融合基因在家蚕细胞中的表达和活性研究

根据细胞因子协同作用的特点，采用重组dna技术构建了人干扰素(ifn)α2b-胸腺肽(thy)α1融合基因，克隆到pbacpak8上，获得重组转移载体pbacpak-ifn-thy.与线形化bm-bacpak6病毒基因组dna共转染家蚕细胞，经过体内重组，筛选到重组病毒bm-bacpak-ifn-thy.将bm-bacpak-ifn-thy感染家蚕细胞进行表达.dna印迹证明ifn-thy已插入bm-bacpak6中（4kb左右的杂交带）；sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳、蛋白质印迹证明ifn-thy在家蚕细胞中得到了表达（分子质量为23ku左右）,且具有ifn蛋白的免疫原性；微量细胞病变抑制法和玫瑰花结法显示96h的表达产物ifn活性为3.72×104u/ml，120h表达产物ifn活性为3.10×105u/ml，48～72h表达产物ifn活性较低；48～120h表达产物的玫瑰花结形成率均在10％以上.结果表明融合基因在家蚕细胞中得到了高效表达，表达的融合蛋白具有ifn-α2b和thy-α1的双重生物活性.