耐热古菌芝田硫化叶菌海藻糖生成相关酶的基因克隆、表达和序列分析

从耐热古菌海藻糖芝田硫化叶菌b12中分别克隆出海藻糖生成相关酶——麦芽寡糖基海藻糖合酶的基因trey和麦芽寡糖基海藻糖基水解酶的基因trez，测定了其核苷酸序列并进行了表达.其中trey编码的蛋白质有728个氨基酸、分子质量为86ku；trez编码的蛋白质有559个氨基酸、分子质量为65ku.它们与已报道的其他微生物的两个海藻糖生成相关酶的基因进行同源性比较，trey和trez的同源性分别为93%和76%（硫矿硫化叶菌p2）、97%和95%（硫矿硫化叶菌km1）、63%和66%（嗜酸热硫化叶菌atcc33909）、48％和50%（节杆菌q36）、48%和52%（根瘤菌m11）、50%和52％（短杆菌）.通过phylip软件进行这些基因序列的分类聚类计算，获得这几种微生物间两个酶类的蛋白质系统进化树；经过氨基酸序列比较分析还发现，所有的海藻糖生成相关酶都含有糖苷酶家族13中几个高度保守的α-淀粉酶催化活性区，推测这些海藻糖生成相关酶都可能有着共同的进化来源.