亮氨酸拉链提高小鼠血浆中剪接的凝血因子ⅷ凝血活性

培养细胞实验表明，亮氨酸拉链通过改善内含肽(intein)的蛋白质剪接效率，提高双载体转b区缺失型凝血因子ⅷ(bdd-fⅷ)基因细胞剪接fⅷ蛋白的分泌量和活性．本文从c57bl/6小鼠门静脉注射含亮氨酸拉链和sspdnab内含肽融合的bdd-fⅷ的重链和轻链基因双表达载体，48h后，检测到血浆的重链分泌量和fⅷ活性分别为(298±67)μg/l和(1.15±0.29)u/ml，明显高于不含亮氨酸拉链的双载体转bdd-fⅷ基因对照小鼠((179±59)μg/l和(0.58±0.19)u/ml)．结果表明，亮氨酸拉链通过改善蛋白质反式剪接，提高基于蛋白质剪接的双载体转bdd-fⅷ基因小鼠血浆的凝血活性，为进一步双腺相关病毒(aav)载体转bdd-fⅷ基因的甲型血友病基因治疗研究提供了依据．