幽门螺旋杆菌肿瘤坏死因子α诱导蛋白活性分子的构建、结晶及初步晶体学研究

幽门螺旋杆菌中的肿瘤坏死因子α诱导蛋白(tipα)被鉴定为幽门螺旋杆菌致病感染中的新型致癌因子．tipα通过nf-κb的激活诱导肿瘤坏死因子α(tnf-α)的大量表达，从而促使宿主的炎症反应以及肿瘤发生、发展的进程．tipα的同源二聚体为其发挥生物学功能的活性形式，此二聚体以两个单体间n端半胱氨酸形成的二硫键(cys25-cys25与cys27-cys27)共价连接．tipα(25-192)的基因克隆至载体pet22b中，并且在大肠杆菌菌株bl21(de3)中以可溶形式高水平表达．重组蛋白经过ni2+金属亲和层析、阳离子交换层析和凝胶阻滞层析进行分离纯化．tipα蛋白样品分别通过悬滴和microbatch的方法进行结晶搜索和优化．母体和硒代晶体分别衍射到2.2?和2.6?，均属于c2空间群，并且具有相似的晶胞参数．母体晶体的晶胞参数为a=127.01?，b=47.57?，c=96.5?，α=γ=90°，β=127.5°．