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生物化学与生物物理进展 1995
细胞内rt－pcr扩增免疫球蛋白重链可变区基因Keywords: 细胞内rt－pcr,重链可变区基因,渗透化处理 Abstract: 通常,逆转录pcr(rt-pcr)需要高质量的mrna,操作过程复杂,效率低且易受到rnase的破坏,为了简化操作,提高效率,用10%甲醛盐溶液固定杂交瘤细胞,以np-40渗透化处理细胞后做rt-pcr,获得了大约350bp的特异性免疫球蛋白重链可变区基因片段,与用同一对引物得到的常规rt-pcr扩增产物一致.这项技术可用于获得特定结构基因片段,连结并扩增嵌合蛋白基因及构建多克隆免疫球蛋白文库等.
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