一个可能与t细胞发育相关的新的c2h2型锌指蛋白基因的克隆(英)

一些在组织和细胞分化中起重要作用的蛋白质包含锌指结构域.为了克隆分离和研究与造血细胞分化和发育成熟相关的蛋白基因，利用编码c2h2型锌指蛋白结构域中部分保守氨基酸序列设计简并引物，以骨髓cdna为模板，进行pcr扩增，得到若干新的锌指蛋白基因est.用其中一条为探针筛选人骨髓cdna文库，获得了一个新的锌指蛋白基因全长cdna，genbank收录号为af246126，长3888bp，包括一个完整阅读框，编码686个氨基酸，包括17个典型的和2个非典型的c2h2模体，命名为hzf2.rna印迹、人多组织mrna斑点杂交分析结果显示,其在t淋巴细胞发育和定居的器官组织胸腺、淋巴结中有较高表达，在脾脏、胎肝有中度表达，在b淋巴细胞发育的骨髓中表达很低，在外周血几个淋巴细胞系中仅有极微量的表达，提示hzf2可能对于t淋巴细胞发育和增殖有重要功能.该基因也在脑组织的若干部位、胎盘及肾上腺有较高表达，在多种其他组织细胞有微量表达，说明其可能对维持这些组织细胞的生理功能也起一定作用.将编码hzf2读框的dna顺序克隆到pegfp-n1载体中，转染3t3细胞，证明表达的hzf2-gfp融合蛋白定位于细胞核，这与根据hzf2蛋白结构推测其可能作为dna结合蛋白行使调节基因转录的功能是一致的.