单卵rt-pcr方法的优化和对牛卵母细胞中发育相关基因的表达研究

到目前为止，虽然许多动物如羊、牛、猪、鼠、兔、马、骡等均已克隆成功，但克隆技术普遍存在着克隆效率低、流产率高、畸胎、巨胎和死亡率高等问题.为了较全面地探索其基因方面的原因，需要对大量的候选基因进行分析.而利用传统的rt-pcr方法从单个卵母细胞或胚胎中获得的rna量不足以分析大量的基因.为了解决这一问题，利用并优化了一套全新的扩增细胞中整体cdna的方法，使微量材料进行大量的基因表达分析成为现实.通过该方法研究了与发育相关的重要基因il6、ifτ、cx43、psmc3、oct4和dnmt1在牛卵母细胞中的表达.il6、ifτ和cx43的表达与前人报告的结果相同，而dnmt1和psmc3在牛卵母细胞中表达情况此前未见报道.