bpoz基因剔除小鼠模型的建立

bpoz是在卵巢癌等肿瘤组织中表达下调的细胞生长抑制基因，建立bpoz基因剔除小鼠模型，可以为在体研究bpoz基因的生物学功能及其与肿瘤发生的关系创造条件.运用生物信息学手段确定小鼠bpoz基因组序列,设计基因剔除策略，构建完成了基因剔除载体xppnt-bpoz.以电穿孔方法将基因剔除载体导入es细胞，用g418和ganciclovoir进行正负筛选，获得抵抗克隆，pcr和dna印迹鉴定出正确同源重组的es细胞克隆.将同源重组的es细胞注入小鼠囊胚，获得嵌合体小鼠.嵌合体小鼠与c57bl/6j小鼠交配后获得aguoti毛色的小鼠30只，其中15只为bpoz基因剔除杂合子小鼠，阳性率为50%.在雌雄杂合子交配的后代中获得纯合子小鼠.初步的表型观察发现bpoz基因剔除小鼠发育正常，有繁殖能力，进一步的表型分析工作正在进行之中.