利用基因诱捕技术进行小鼠基因剔除的初步研究

对利用基因诱捕技术进行小鼠基因剔除做了初步的探索，为进一步应用该技术进行小鼠基因功能研究奠定了基础.利用基因诱捕载体转染小鼠es细胞，获得了36株neo基因单拷贝整合的诱捕es细胞，其中14株细胞表达有活性的β半乳糖苷酶.将3株诱捕es细胞分别经显微注射引入到受体囊胚中，再植入假孕母鼠的子宫中使其发育成小鼠.两株细胞得到了程度不同的嵌合体小鼠，其中一株诱捕es细胞整合至生殖系.利用质粒拯救实验获得了诱捕载体整合位点附近的基因组序列，通过序列比对发现被诱捕的基因可能是一个新基因.x-gal染色结果显示，该基因的表达局限于小鼠腹部及肢芽的部位.