pparδ启动子克隆及活性分析

过氧化物酶体活化的受体(peroxisomeproliferator-activatedreceptors，ppars)α、δ、γ是核受体超家族成员，它们是配体调节的转录因子，在脂类代谢过程中起非常重要的作用.pparδ在骨骼肌中的表达分别要比pparα和pparγ高10倍和50倍，它的活化将导致骨骼肌细胞中有氧代谢相关的基因表达升高.为研究pparδ在骨骼肌中的表达调节，克隆了pparδ基因5′侧翼区2kb的dna片段，体外实验证明该片段可以启动gfp表达.然后通过不同的限制酶消化获得不同长度的pparδ启动子，经启动子活性实验分析发现，转录起始位点5′侧翼区上游179bp的片段就具有启动子活性.通过在线工具对2kb启动子上潜在的转录因子和结合位点进行分析，发现有4个肌细胞增强因子2(myocyteenhancerfactor2，mef2)潜在的结合位点，在mef2a共转染实验中，发现随着mef2a浓度升高，2kb的pparδ启动子转录活性增强，表明mef2a确实能提高pparδ启动子活性.上述结果为研究pparδ在肌肉中的表达调节和功能提供了依据.