人源蛋白酶体α亚基6(proteasomesubunitalpha6)在酿酒酵母表面展示

为构建人源蛋白酶体α亚基6(α6)的酵母展示体系，研制其单克隆抗体用于抗体表位分析和研究泛素-蛋白酶体途径，建立绕过重组抗原表达及纯化制备、将展示重组抗原直接应用于抗体检测的方法.在酵母展示表达载体picas中引入his.tag标签，将编码α6的基因psa6_human克隆到酵母表面展示载体picas-h上，用流式细胞仪检测其抗原表位活性，以表面展示α6的重组酵母细胞，结合酶联吸附免疫检测技术，建立酵母(yeast)-elisa检测技术，应用于检测小鼠单克隆抗体及单抗效价.酵母细胞培养48h后获得抗原α6的高效表面展示，展示的α6具有良好的抗原活性和特异性，将α6的展示酵母用于yeast-elisa的初步实验结果显示可有效检测和筛选到抗α6抗体.