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生物化学与生物物理进展 2001
虎纹镇痛活性肽在毕赤酵母中的分泌表达Abstract: 虎纹镇痛活性肽hwap-ⅰ是从虎纹捕鸟蛛初毒中分离纯化,具有镇痛活性的多肽类神经毒素.为了在p.pastoris中高效分泌表达hwap-ⅰ,依照rt-pcr的结果,人工合成编码虎纹镇痛活性肽的基因片段,与酵母表达载体ppic9k重组,构建表达质粒ppic9k-hwap-ⅰ.转化gs115宿主菌后,筛选出整合型his+muts表达菌株.经诱导培养后,sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳(page)证明hwap-ⅰ在毕赤酵母中能有效分泌表达,产物的分子质量为4ku左右,产量达80mg/l.体外小鼠输精管阻断实验证实表达产物具有明显的生物活性.
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