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生物化学与生物物理进展 2001
从人白细胞cdna文库筛选凋亡素相互作用蛋白Keywords: 凋亡素,酵母双杂交,abp280,免疫共沉淀 Abstract: 来源于鸡贫血病毒的小分子蛋白-凋亡素(apoptin)能够选择性诱导肿瘤细胞凋亡,为研究其选择性诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制,利用酵母双杂交系统筛选从人白细胞cdna文库筛选apoptin相互作用蛋白,核酸序列分析及同源性检索表明,其中一个与abp280(actin-bindingprotein280)有高度同源性.细胞免疫共沉淀实验结果显示:在哺乳动物细胞水平仍能够检测到apoptin与abp280片段的特异的相互作用.分别构建缺失c端11个氨基酸、中间33~46位氨基酸和二者均缺失的apoptin的3个突变体,突变体与abp280相互作用研究表明:apoptin的33~46位氨基酸(核外运信号)对于apoptin与abp280的相互作用是必需的,而c端核定位信号/dna结合序列对于apoptin与abp280的相互作用不是充分必要的.
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